摘要:目的 研究伊血安的长期毒性。方法 观察连续给予大鼠受试药物所产生的毒性反应，根据严重程度、靶器官、恢复和发展情况，确定无毒反应剂量。结果 以原生药干膏ig给予151.2、67.2、33.6 g(生药)·kg-1伊血安4周（日剂量分别为临床拟用量的108 、48 、24倍),3个剂量组的凝血时间均缩短，大剂量组的血清肌酐含量稍增高，其余均未见明显的毒性反应；停药观察2周后，上述改变均恢复至正常水平，未见明显的迟缓毒性反应。 结论 伊血安长期用药对大鼠无明显毒性，按临床拟用剂量、用药途径和疗程是安全的。
关键词：伊血安;大鼠;血清肌酐;长期毒性
中图分类号:R96 文献标志码: A 文章编号:1006 - 0103 ( 2010 ) 03 - 0357 - 02
Study of long一term toxicity of Yixuean in rats
HOU Xiao-tao1，MU Li-qun2，ZHOU Jiang-yu1，HUANG Lian-fang3，DAI Hang1
(1. Guangxi Traditional Medical University , Nanning , Guangxi , 530001 P. R. China ; 2. Guangxi Medictop Pharmaceutical Co.Ltd,Nanning , Guangxi，530219 P. R. China ; 3. Guangxi Heli Pharmaceutical Co. , Ltd , Nanning , Guangxi , 530219 P. R. China )
Abstract: OBJECTIVE To investigate the long-term toxicity of Yixuean in rats. METHODS The long-term toxicity and severity occurred,target organ,recovery condition after successive administration of Yixuean in rats were observed. The safe dosage was determined. RESULTS Three tested dosage groups at 151.2,67.2,33.6 g·kg-1(108 , 48 , 24 times for clinical dosage ) were set up for 4 weeks’intragastric administration，respectively. The Clotting time was all shortened in three dosage groups and Sr of rats with high dosage was slightly increased. There were no other significant toxic reaction. The above changes were restored to normal levels at 2 weeks after drug withdrawal,and delayed toxicity reaction after drug withdrawal was not discovered. CONCLUSION Yixuean has no obvious toxicity in rats for long-term administration.
Key words : Yixuean ; Rats ; Cr ; Long-term toxicity
CLC number : R96 Document code : A Article ID:1006-0103(2010)03-0357-02
伊血安是采用广西瑶族民间专治妇科血症验方研发的三类中药新药，由滇桂艾纳香、益母草、延胡索、甘草等药味组成，具有活血止血、行气止痛的功效，用于产后恶露不绝、流产后子宫出血不净的治疗。为临床用药的安全，文中特对伊血安进行了长期毒性的研究。
1实验部分
1.1试药、动物和仪器
伊血安(广西万寿堂药业有限公司，批号:941022，每袋15 g，相当于28 g原生药干膏，相当于8.15 g(生药).g-1;总胆红素测定试剂(北京中生生物工程高技术公司，批号:950117 );其余试剂均为广西台资标佳(BGH)公司产品。SD大白鼠(广西中医药研究所动物室)，♀♂兼用，体重130~150 g。CHEM-5型半自动生化测定仪(日本ERBA公司)
1. 2 方法与结果
1.2.1 方法[1-2] 将80只大鼠随机均分为4组，高、中、低剂量组分别ig给予151.2,67. 2,33.6 g(生药)·kg-1受试药物(日剂量分别为临床量的108、48、24倍)，空白对照组ig给予大鼠常水，每日上午8:00~9:00给药，给药体积均为10 mL·kg-1，连续4周。观察给药期间大鼠的表现及毒性反应;每周称重1次，并据此调整给药量。末次给药后的次日，各取12只大鼠ip 40 mg·kg-1戊巴比妥钠麻醉，经腹主动脉采血做血液学、血液生化学检查;剖取部分脏器称重，按每100 g体重所含脏器重量换算成脏器重量指数；取主要脏器做肉眼及组织学检查。将各剂量组的测定值与空白组比较，做组间t检验。各组余下的8只大鼠在停药观察2周后同法处理。
1.2.2 观察项目 给药期间及停药观察期间，各组大鼠的外观、行为、呼吸、四肢活动、进食、排泄等情况均未见明显异常，无死亡现象;给药组大鼠的体重增长正常，与空白组差异无统计学意义(表1)。
表1伊血安对大鼠体重增长的影响(g,±s,n=20)
Table 1 The body weight gain in long-term toxicity of Yixuean ( g,±s,n =20 )
组别（g·kg-1） 第0天 第7天 第14天 第21天 第28天
受试组（151.2） 153.0±9.2 173.0±6.1 194.4±9.3 212.4±9.5 230.3±12.8
（67.2） 152.0±8.9 171.4±5.6 192.1±10.2 210.5±11.3 229.0±11.8
（33.6） 153.0±9.6 171.0±3.9 190.4±9.0 208.6±9.4 228.4±9.3
空白组 148.8±12.1 166.8±5.1 186.0±9.1 203.7±9.8 224.4±8.8
1.2.3 血液学的检查 检查血红蛋白的含量(Hb,HiCN法)、红细胞数(RBC，显微镜计数法，下同)、白细胞数(WBC )、血小板数(BPC )、网织红细胞( Ret )、白细胞分类—嗜中性粒细胞(N)及淋细胞( L)的比值、凝血时间(CT，毛细管法)。给药4周后，高、中、低剂量组大鼠的CT均短于空白组，差异有统计学意义;给药组大鼠的其他测定值均在正常范围内，与空白组比较，差异均无统计学意义(表2)。停药2周后，给药组大鼠的全部测定值均在正常范围内，与空白组比较均无统计学意义。
表2伊血安给药4周后大鼠血液学的检查结果(±s,n=12)
Table 2 Results of blood test after 4 weeks of administration ( ±s ,n=12)
项目 高剂量组 中剂量组 低剂量组 空白组
Hb/g·kg-1 121.2±11.7 124.0±7. 9 124. 7±5. 2 120. 2±6.9
RBC/1012 ·L-1 6.17±0.74 6.01±0.74 5.92±0.82 6.12±0.41
WBC/109 ·L-1 5.46±1.13 5.21±0. 78 5. 34±1. 13 4. 85±0.46
BPC/109·L-1 255.8士37.3 263.3±35.5 262.5±40.7 258.2±30.3
Ret/‰ 4.25±1. 06 4. 25±0.87 4.58±0.79 3.91±0. 83
N 0. 34±0.08 0.35±0.05 0.33±0.09 0.32±0. 07
L 0. 65±0.07 0.65±0.05 0.66±0.09 0.67±0. 06
CT/min 2.41±0. 35** 2.56±0.36** 2.86±0.3* 3.26±0. 37
与空白组比较:*P<0.05,** P < 0. 01
1.2.4 血液生化学的检查 测定各组大鼠的血清中血清总蛋白(TP，双缩脉法)、白蛋白(ALB，溴甲酚绿法)、总胆红素(Bil，重氮法)、尿素氮( Un ,脲酶法)、肌酐( Cr，苦味酸动力学法)、总胆固醇(TCH,酶法)、血糖(Glu ,酶法)的含量及谷丙转移酶(ALT，动力学法)、谷草转移酶( AST，动力学法)的活性。给药4周后，高剂量组的Cr含量稍高于空白组，差异有统计学意义;给药组大鼠的其他测定值均在正常范围内，与空白组比较，差异均无统计学意义(表3)。停药2周后，各给药组的全部测定值均在正常范围，与空白组比较差异无统计学意义。
1.2.5 各脏器的测定 给药4周后，高剂量组的肝脏指数稍高于空白组，差异有统计学意义，但在正常范围内波动;给药组大鼠的其他脏器指数均与空白组的相近，差异均无统计学意义(表4)。停药2周后，给药组大鼠的全部测定值均在正常范围，与空白组比较，差异无统计学意义。给药4周后及停药2周后剖取各组大鼠的心、肺、肝、脾、肾、胃、小肠、结肠、膀胱、睾丸等做肉眼观察，均未见明显的形态学改变;剖取高剂量组、空白组大鼠的各脏器做组织学检查，未见药物所致的组织学改变。
表3伊血安给药4周后大鼠血液生化学的检查结果(±s ,n=12)
Table 3 Results of blood biochemical test after 4 weeks of administration ( ±s ,n=12)
项目 高剂量组 中剂量组 低剂量组 空白组
TP/g·L-1 69. 1±3. 1 70. 6±2.7 67.9±3.0 68.5±2. 5
ALB/g·L-1 28.5±2. 4 30. 9±1.5 31.3±1.0 30. 1± 1.7
BiL/umol·L-1 1.11±0.78 1.34±0. 66 1. 15±0. 65 1. 23±0. 57
ALT/u 19. 1±8. 8 22. 4±8. 1 20. 9±8. 5 19. 9±2. 1
AST/u 108.3±25.1 101.1±25.6 105.5±33.8 108.0±59. 0
Un/ mmol·L-1 6. 49±0. 73 6. 44±0. 77 5. 85±0. 94 5. 96± 0. 80
Cr/umol·L-1 88. 8±28.7* 68.3±26.4 64.3±11.9 55.9±9. 8
TCH/mmol·L-1 1.06±0.37 1.23±0.21 1.20±0.31 1.24±0. 35
Glu/mmol·L-1 4.61±0.93 5.25±1.29 4.48±0. 81 4. 88±1. 10
与空自组比较:*P<0.01
表4伊血安给药4周后大鼠脏器指数的测定结果[g·(100 g)-1BW, ±s]
Table 4 Results of organ index determination after 4 weeks of administration [ g·(100 g)-1BW,±s)]
脏器 IL 高剂量组 中剂量组 低剂量组 空白组
心 12 0.31±0. 04 0. 31±0. 04 0. 30±0. 04 0. 28±0. 03
肝 12 2. 70±0. 50* 2. 63±0.44 2.51±0. 25 2. 35±0. 21
脾 12 0.26±0.07 0.25±0.05 0. 24±0. 04 0. 22±0. 02
肾 12 0. 68±0. 07 0. 67±0.09 0.65±0.06 0.63±0.06
胸腺 12 0.18±0.03 0.17±0. 02 0. 17±0.02 0.17±0.04
子宫 6 0. 12±0.03 0.16±0. 04 0. 14±0. 03 0. 14±0. 04
睾丸 6 1.26±0.09 1.35±0.12 1.34±0.17 1.28±0.20
与空白组比较:*P< 0. 05
2 讨论
以151.2、67.2、33.6 g(生药)·kg-1的剂量分别给大鼠连续ig伊血安原生药干膏4周，3个剂量组的凝血时间均缩短，大剂量组的血清肌酐含量稍增高，其余均未见明显的毒性反应;停药观察2周后，上述改变均恢复至正常水平，未见明显的迟缓毒性，可认为伊血安安全可靠，可长期服用。
参考文献
[1]邓家刚，吴玉强，郑作文，等.复方刺苋颗粒长期毒性研究[J].时珍国医国药，2007,18(6)：1298—1300.
[2]李海花，李其珍.苦甘胶囊的长期毒性实验[J].华西药学杂志，2006, 21(6)：562—564.
地址：广西南宁市良庆区荣光南路一号
电话：0771-4510118、4510138、4510148
